Apo AI hamuje tworzenie komórek piankowatych u myszy z niedoborem apoE3 po przyleganiu monocytów do śródbłonka

Wcześniej wykazano, że ekspresja ludzkiego transgenu apo AI na tle pozbawionym apoE3 zwiększa poziom cholesterolu HDL i znacznie zmniejsza powstawanie uszkodzeń smug tłuszczowych. W celu zbadania mechanizmu, prelezyjne zdarzenia w rozwoju blaszki miażdżycowej badano w 6- do 8-tygodniowej myszy z niedoborem apoE3 i apo Ef / ludzkim transgenicznym apo AI. Ilościowa ocena osadzenia lipidów podśródbłonkowych metodą mrozo-pękania i głębokiego trawienia mikroskopu elektronowego wykazała, że podwyższony apo AI nie wpływał na rozmieszczenie lub ilość złogów lipidowych podśródbłonkowych łuku aorty. Barwienie immunohistochemiczne dla VCAM-1 wykazało podobną ekspresję na komórkach śródbłonka w prelejonalnych miejscach rozgałęzień aorty od myszy z niedoborem apoE3 i apo E3 / ludzkiej apo AI transgenicznej. W transmisyjnej mikroskopii elektronowej wykryto monocyty związane z łukiem aorty u myszy obu genotypów, a barwienie immunohistochemiczne wykazało, że obszar zajmowany przez związane komórki jednojądrzaste pozostał niezmieniony. Aktywność paraoksonazy i aktywność esterazy arylowej w surowicy nie różniły się między myszami z niedoborem apoE3 i apo E3 / ludzką apo AI. Dane te sugerują, że wzrost poziomu apo AI i cholesterolu HDL hamuje tworzenie komórek piankowatych u myszy transgenicznych apo E3 / ludzkiej apo AI na etapie następującym po odkładaniu lipidów, aktywacji śródbłonka i przyleganiu monocytów, bez zwiększenia paraoksonaz związanej z HDL. Wprowadzenie Istnieje silna odwrotna korelacja między cholesterolem HDL (HDL-C) a częstością występowania choroby niedokrwiennej serca. Mechanizmy, dzięki którym podwyższony poziom HDL-C zmniejsza ryzyko sercowo-naczyniowe, nie są dobrze znane. Zaproponowano trzy główne hipotezy wyjaśniające przeciwmiażdżycową rolę HDL: (a) promocja transportu wstecznego cholesterolu; (b) bezpośrednia ochrona ściany naczynia lub hamowanie utleniania lipoprotein; lub (c) marker obniżonego poziomu aterogennych lipoprotein. Większość badań eksperymentalnych zaprojektowanych do testowania tych hipotez wykorzystuje systemy in vitro do oceny właściwości cząstek HDL Badania wykazały, że cząsteczki HDL mogą wpływać na wypływ cholesterolu z hodowanych komórek (1), zakłócać wiązanie LDL z macierzą pozakomórkową (2), hamować adhezję ekspresja molekularna na hodowanych komórkach śródbłonka (3) i hamowanie utleniania miedzi i komórek lipoprotein (4). Jednak niewiele jest bezpośrednich dowodów na to, że HDL spełnia te funkcje in vivo. Ostatnio myszy transgeniczne i nokautowe o zmienionym metabolizmie lipoprotein i podatności na miażdżycę dostarczyły wglądu w rolę HDL w miażdżycy. Dwa niezależne badania (5, 6) dostarczają mocnych dowodów na to, że HDL ma bezpośredni wpływ na tworzenie zmian. W tych badaniach myszy pozbawione ApoE (E0) (7, 8), które wytwarzają komórki piankowate i zmiany fibroproliferacyjne histologicznie podobne do ludzkiej miażdżycy tętnic (9, 10), były hodowane z ludzkimi myszami transgenicznymi (AA) Apo AI ( 11, 12). Zwiększenie 2-krotnego HDL-C spowodowało 5- do 20-krotne zmniejszenie obszaru uszkodzenia komórek piankowatych w 12 do 16-tygodniowych myszach apo A / ludzkie apo AI transgenicznych (E0 / hA-I) (5,6). ). Ponadto u 32-tygodniowych myszy występowała silna odwrotna zależność między obszarem miażdżycowym a HDL-C, który był niezależny od poziomu non-HDL-C (5). Te eksperymenty pokazują, że podwyższony poziom HDL-C bezpośrednio hamuje miażdżycę i nie są jedynie markerami obniżonych poziomów aterogennych lipoprotein. Wcześniejsze badania na myszach z niedoborem apo E wykazały, że zdarzenia prelezyjne obejmują zatrzymanie lipidów (13), śródbłonkową ekspresję VCAM-1 (14) i wiązanie monocytów z miejscami rozgałęzień tętniczych (9). W niniejszym badaniu in vivo porównaliśmy te zdarzenia preleferencyjne i aktywność serotonozoksonaz, enzymu antyoksydacyjnego związanego z HDL. Nasze dane pokazują, że podwyższone apo AI i HDL-C hamują aterogenezę u myszy E0 na etapie następującym po odkładaniu lipidów, aktywacji śródbłonka i przyleganiu monocytów. bez wpływu na aktywność paroksonazową w surowicy. Metody Myszy. Wszystkie myszy zostały odstawione od piersi w wieku 3 tygodni i karmione standardową karmą dla dzieci (PicoLab Rodent 20, nr katalogowy 5053, Ralston Purina Co. St. Louis, Missouri, USA: 20% białka ze źródeł roślinnych i zwierzęcych, 4,5% wag / tłuszcz wtórny, 0,02% wag./wag. cholesterol, brak kazeiny, brak cholanu sodu). Wszystkie myszy były trzymane w specyficznym środowisku wolnym od patogenów. W niektórych doświadczeniach myszy z niedoborem ApoE (7) i apo E3 / ludzką myszą trans Apo AI (5) uzyskano z istniejącej kolonii myszy na Uniwersytecie Rockefellera. Te myszy miały mieszane pochodzenie genetyczne i były miotami pierwszej generacji otrzymanymi z krzyżówek E0 x E0 / hAI
[przypisy: laboratorium elbląg ul nowowiejska, palenie papierosów a karmienie piersią, cykl miesiączkowy kalkulator ]
[więcej w: kolposkopia szyjki macicy, wojewódzka przychodnia stomatologiczna w gdańsku, poliklinika gdańsk ]