Szybkie wytwarzanie szerokiej odporności komórek T u ludzi po pojedynczym wstrzyknięciu dojrzałych komórek dendrytycznych czesc 4

Miejscową reakcję w postaci rumienia bez stwardnienia obserwowano u więcej niż połowy pacjentów po wstrzyknięciu DC z domieszką antygenu. Wszystkie wstrzyknięcia DC pulsowane antygenem były dobrze tolerowane, bez toksyczności ogólnoustrojowej, z wyjątkiem przejściowego zmęczenia (D5) i niskiej gorączki (D6) w dniu wstrzyknięcia. Wśród 4 osób, którym wstrzyknięto same antygeny (bez DC), u 3 wystąpił rumień w miejscu TT (z obecnością stwardnienia u pacjenta), a miał łagodną miejscową reakcję w miejscu wstrzyknięcia MP, podczas gdy w KLH nie zaobserwowano reakcji miejscowej. strona w którymkolwiek z tematów. Żaden z uczestników badania nie doświadczył wysypki ani powiększenia węzłów chłonnych ani nie rozwinął żadnych klinicznych dowodów na chorobę autoimmunologiczną lub chorobę reumatoidalną. Jeden osobnik rozwinął przemijające reakcje ANA o niskim mianie (1:40) w 60 dni po immunizacji, bez jakichkolwiek innych serologicznych lub klinicznych dowodów autoimmunizacji. Odpowiedź immunologiczna Odpowiedzi komórek T CD4 +. Nie przeprowadzono primingu do KLH, co oceniono na podstawie proliferacji specyficznej dla antygenu po wstrzyknięciu kontrolnych DC lub antygenów tylko w 7- lub 30-dniowym punkcie czasowym (Figura 2a). Przeciwnie, priming do KLH był widoczny u wszystkich 9 osób po wstrzyknięciu antygenowo-impulsowych DC (P <0,001). Aby zilustrować dane, pokazano pomiary na reprezentatywnym przedmiocie (D1) (Figura 2b). Priming do KLH odnotowano 30 dni po wstrzyknięciu u 8 z 9 pacjentów i 60 dnia u wszystkich pacjentów, ale było to widoczne już po 7 dniach po wstrzyknięciu u 2 pacjentów (nie pokazano). U 3 pacjentów z dłuższym okresem obserwacji, przeżycie KLH było nadal wykrywalne w 60. 90 dni po wstrzyknięciu u 2 z 3 osobników. Odpowiedzi proliferacyjne komórek T specyficzne wobec KLH pośredniczyły w limfocytach T CD4 +, ponieważ wyczerpanie limfocytów T CD8 + nie zmieniło odpowiedzi (Figura 2c). Figura 2 (a) Wypełnianie do KLH po impulsach DC KLH. Proliferacja specyficzna dla KLH na początku i po 30 dniach po kontrolnym wstrzyknięciu DC i pulsacyjnym wstrzyknięciu DC z KLH (z wyjątkiem D5, który wykazał priming dopiero w dniu 60). Dla A1-A4 przedstawione dane dotyczą linii bazowej i 30 dni po wstrzyknięciu antygenu. Dla każdego pokazanego pomiaru, 105 PBMC inkubowano z 10 .g / ml KLH przez 5 dni. Wyniki wyrażono jako inkorporację [3H] TdR w zliczeniach na minutę. SEM dla wszystkich pomiarów było <20%. (b) Kinetyka primingu KLH określona przez proliferację swoistą dla antygenu u reprezentatywnego podmiotu (D1). Dla każdego testu inkubowano 3 x 104 lub x 105 PBMC na studzienkę z lub 10 .g / ml KLH przez 5 dni. Wyniki, jak pokazano dla 105 PBMC na studzienkę, wyrażono jako inkorporację [3H] TdR w zliczeniach na minutę. (c) charakter CD4 odpowiedzi proliferacyjnej KLH. Proliferacja specyficzna dla KLH w nierozdzielonych PBMC była porównywana z tą po wyczerpaniu limfocytów T CD4 + i CD8 + przez płukanie. Podobnie, odporność specyficzna wobec TT została wzmocniona u 5 z 6 osobników, co oceniono na podstawie proliferacji swoistej dla antygenu (P = 0,001) (Figura 3). Nie zaobserwowano zwiększenia odpowiedzi TT u 3 osobników (D1, D3, D8), którzy nie otrzymywali impulsowych DC DC. Spośród 4 pacjentów poddanych testowi skórnemu na TT w punkcie wyjściowym i miesiąc po wstrzyknięciu DC, wszystkie 4 (w tym D6, u których nie stwierdzono zwiększenia odpowiedzi proliferacyjnej) wykazały zwiększoną odpowiedź DTH na TT (Tabela 2). Figura 3Bolowanie odporności swoistej dla TT po impulsach DC pulsujących TT. Proliferację specyficzną dla TT mierzono na początku i 30 dni po wstrzyknięciu kontrolnym DC i wstrzyknięciu DC pulsującym TT. W D1, D3 i D8, TT był pominięty w DC impulsów antygenowych z powodu silnych wyjściowych odpowiedzi DTH. Dla A1-A4 przedstawione dane dotyczą linii bazowej i 30 dni po wstrzyknięciu tylko antygenu. Dla każdego pokazanego pomiaru, 105 PBMC inkubowano z 3 .g / ml TT przez 5 dni. Wyniki wyrażono jako wskaźnik stymulacji. SEM dla wszystkich pomiarów było <20%. Tabela reakcji 2DTH na TT: odpowiedź na immunizację Odpowiedzi komórek T CD8 + w nie hodowanych PBMC. Komórki wydzielające IFN-y specyficzne dla MP lub grypy oznaczono ilościowo w świeżych PBMC przy użyciu testu ELISPOT. Nie obserwowano znaczącego wzrostu MP lub IFN-y reagującej z grypą. SFC, po kontrolnym wstrzyknięciu DC lub wstrzyknięciu samego antygenu. Przeciwnie, wzmocnienie swoistych dla MP komórek T po DC pulsowanych antygenem było obserwowane u wszystkich osobników 6A * 0201a-pozytywnych (P <0,001) iw żadnym z 3 osobników kontroli negatywnej A * 0201a (Figura 4a). Aby zilustrować dane, pokazano pomiary na reprezentatywnym przedmiocie (D6) (Figura 4b). Pięć z 6 osobników miało. 2-krotny wzrost w limfocytach T reaktywnych wobec MP (mediana 5-krotności, odpowiadająca 100. 200 MP reaktywnym komórkom T na 106 PBMC). Wzrosty w specyficznych dla grypy komórkach T w teście ELISPOT obserwowano u 4 z 6 osobników po immunizacji (D1, D2, D3 i D5, dane nie przedstawione) [więcej w: zapalenie stawu żuchwowo skroniowego, nietolerancja laktozy badania, frytki z piekarnika kalorie ] [więcej w: chemioterapia adjuwantowa, laboratorium elbląg ul nowowiejska, chirurgia stomatologiczna gdańsk ]