Wirusowe białko, które selektywnie obniża poziom ICAM-1 i B7-2 i moduluje kostymulację komórek T ad 6

Zgodnie z oczekiwaniem, komórki NKL skutecznie zabijały kontrolne komórki BJAB eksprymujące pusty wektor pcDNA3 (Figura 5). Co ważniejsze jednak, komórki BJAB zaprojektowane do ekspresji K5 nie tylko wykazywały podatność na zabijanie NKL, ale były w rzeczywistości bardziej wrażliwe na to zabijanie niż kontrolne (Figura 5). Wynik ten jest zgodny z obniżonymi poziomami MHC-1 na takich komórkach, które wynikają z endocytozy stymulowanej przez K5 łańcuchów klasy I (33,34). Podczas gdy nie obserwujemy silnego działania K5 na ochronę z udziałem cytolizy za pośrednictwem NK, uznajemy, że niedostatek hodowanych linii NK i ich niepewny związek z komórkami NK in vivo utrudnia całkowite wykluczenie takich efektów. Niezależnie od ich roli w biologii NK, najlepiej ustalone funkcje B7-2 i ICAM-1 znajdują się na drodze kostymulacji komórek T, a nasze dane silnie wspierają główną rolę K5 w modulacji tego szlaku (patrz poniżej ). Figura 4 Ludzkie linie komórkowe NK krwi obwodowej nie barwią się na CD28. Ludzkie PBMC wyizolowano z heparynizowanej krwi żylnej od czterech zdrowych dorosłych dawców ochotników przez odwirowanie w gęstości Ficoll. Komórki zabarwiono nasycającą ilością skoniugowanych z fluoresceiną przeciwciał anty-CD28, TriColor anty-CD3 i skoniugowanych z fikoerytryną przeciwciał anty-CD56 i analizowano za pomocą cytometrii przepływowej. Wykresy punktowe reprezentują stan ekspresji CD28 i CD56 populacji negatywnej pod względem CD3. Figura 5NKL pośredniczy w cytotoksyczności ograniczonej do MHC. Każdą docelową linię komórkową oceniano pod kątem zabijania linią komórkową NKL przy różnych stosunkach efektor-do-celu (721,211 jest ludzką linią komórek B pozbawioną cząsteczek MHC-1). Cytotoksyczność zmierzono przez uwalnianie 51Cr po 4 godzinach. Dyskusja Zgłaszamy tutaj, w porozumieniu z Ishido i in. (39), że białko KSHV K5 (ale nie K3) reguluje w dół ICAM-1 i B7-2 z powierzchni komórek B przez indukowanie ich endocytozy i degradacji. Ta regulacja w dół jest wystarczająco silna, aby osłabić stymulację komórek T indukowaną przez interakcje komórek B z komórkami T podczas prezentacji antygenu. Zgodnie z naszą wiedzą, jest to pierwszy raport opisujący białko wirusowe, które moduluje proces kostymulacji komórek T. Na początku byliśmy zaskoczeni, że wirusowa blokada kostymulacji zostanie selektywnie skupiona na B7-2, zamiast atakować zarówno B7-1, jak i B7-2. Wiele funkcji tych dwóch białek jest zbędnych, czego skutkiem jest mocny fakt, że u myszy z knock-out zmiany chorobowe wpływające na te loci mają niejednokrotnie znacznie mniej dramatyczny fenotyp niż podwójny knockout (48). Jednak u takich zwierząt odpowiedzi immunologiczne obejmują wiele typów APC, w tym komórki dendrytyczne i makrofagi, a także komórki B. Spośród tych typów komórek jedynie komórki B są skutecznie zakażane przez KSHV in vivo. W przeciwieństwie do naiwnych komórek B, obecnie przyjmuje się, że aktywowane komórki B są silnymi APC (49. 52). Różnicę tę przypisuje się na ogół indukcji cząsteczek kostymulujących B7, które są nieobecne w naiwnych komórkach B przez aktywację komórek B. Aktywacja komórek B (np. Poprzez przekazywanie sygnału CD40-CD40L w wyniku oddziaływania z aktywowanymi komórkami T) prowadzi do wydajnej regulacji w górę powierzchni B7-2 w ciągu 4 godzin. Przeciwnie, regulacja w górę B7-1 po stymulacji wydaje się być znacznie skromniejsza i następuje znacznie później (53). Komórki B mogą również być aktywowane przez sygnały inne niż dostarczone przez aktywowane limfocyty T, na przykład, sieciowanie receptorów antygenowych komórek B przez anty-Ig i / lub antygen (51, 52, 54) lub ekspozycja na bakterie. LPS. W kilku ostatnich badaniach (52, 55, 56) doniesiono, że komórki B aktywowane przez ekspozycję rozpuszczalnego antygenu mogą nawet stymulować nie naiwne komórki T. To zalewanie wydaje się zależeć wyłącznie od B7-2, ponieważ B7-1 nie jest wyrażany przez komórki B in vivo w tym kontekście (52, 57). Tak więc wydaje się, że B7-2 odgrywa silną rolę w zachowaniu antygenowym pierwszorzędowych komórek B in vivo. Ponadto zauważamy, że ekspresja K5 jest częścią litycznego cyklu replikacyjnego KSHV. Cykl lityczny wirusa opryszczki jest silnie cytopatyczny, prowadząc do zahamowania syntezy makromolekularnej komórki gospodarza i śmierci komórki gospodarza w miarę postępu replikacji wirusa. Oczekuje się, że takie warunki będą wpływać na późną regulację w górę B7-1. Uważa się, że ICAM-1 działa w celu promowania tworzenia synaps odpornościowych (25-27) i promowania przedłużonego przekazywania sygnałów TCR (17, 18). Odpowiednio, oczekuje się, że obniżenie poziomu ICAM-1 może przyczynić się do osłabienia aktywacji limfocytów T i sygnalizacji TCR. Chociaż trudno jest dokładnie określić ilościowo udział blokowania ICAM-1 w osłabieniu aktywacji limfocytów T obserwowanym tutaj, to fakt, że szlaki sygnałowe komórek T nie ablowane przez CTLA4-Ig były osłabione przez ekspresję K5 w APC sugerują, że te efekty były nie wynik obniżenia poziomu B7-2 i prawdopodobnie wynikał on, przynajmniej w części, z modulacji ICAM-1. Proponujemy, że regulacja w dół białek związanych z tworzeniem synaps immunologicznych i kostymulacją może zmniejszać widoczność komórek B zakażonych KSHV komórkom T pomocniczym, zmniejszając w ten sposób CD4 + T Sądzimy, że prawdopodobnie ten efekt jest najważniejszy we wczesnej fazie naturalnej infekcji KSHV, gdy liczba zainfekowanych komórek jest mała, a poziomy rozpuszczalnych cząstek wirusowych i antygenów są niskie. Warunki te maksymalizują zależność od sygnałów kosztotwórczych; także w tym momencie infekcji większość wirusowych antygenów będzie ograniczona do zainfekowanych limfocytów B. Zmniejszone rozpoznawanie takich komórek przez komórki T skutkuje zmniejszeniem odpowiedzi antywirusowych cytokin i zaburzeniem wytwarzania sygnałów stymulacji do generowania CTL, umożliwiając w ten sposób wirusowi ustalenie przyczółka w zainfekowanym gospodarzu.
[hasła pokrewne: aldemed zielona góra dermatolog, leczenie uzależnienia od hazardu, zapalenie stawu żuchwowo skroniowego ]
[hasła pokrewne: cukrzycowa choroba nerek, pogotowie stomatologiczne gdańsk nfz, aldemed zielona góra dermatolog ]