Zespół Hyper-IgM typu 4 z wewnętrznym selektywnym niedoborem limfocytów B w rekombinacji z przełączaniem klasy Ig ad 5

Klonowanie i sekwencjonowanie produktów LM-PCR z komórek aktywowanych sCD40L + rIL-4 (3 u pacjentów i kontroli wykazało, że linker został zligowany z S. region w różnych miejscach w 58 na 103 klonów (56,3%) i 36 na 64 klony (56,2%), odpowiednio. W innych klonach, jak również we wszystkich klonach z aktywowanych komórek T, wykryto niespecyficzne produkty ligacji linker-linker. Dane te pokazują, że w przeciwieństwie do HIGM2 (18), S. DSB występują w komórkach B indukowanych przez CSR od pacjentów z HIGM4. Podsumowując, selektywny defekt CSR komórek B HIGM4 nie jest ani wynikiem wadliwego indukowania genu AID, ani nie jest spowodowany niezdolnością do transkrypcji locus Ig; defekt musi znajdować się za indukowanym AID cięciem DNA regionów przełączników. Analiza SHM w komórkach B CD27 + od pacjentów HIGM4. Następnie badaliśmy wytwarzanie SHM w regionie VH IgM w oczyszczonych komórkach B CD19 + CD27 + od pacjentów i kontroli. Wytwarzanie SHM było normalne w komórkach CD27 + B ze wszystkich badanych pacjentów (n = 6, P2, P5 P9), zarówno pod względem odsetka mutacji na bp (średnio 3,4%, zakres: 1,6. 5,1%) w VH3 -23 region i odsetek zmutowanych klonów (średnio 85,1%, zakres: 71,4. 100%) (Figura 5a). Odkrycie to ostro kontrastuje z silnie defektywnym generowaniem SHM obserwowanym u pacjentów z niedoborem AID (Figura 5a) (13). Średnia częstotliwość mutacji przy resztach dG lub dC wynosiła 64,8% (zakres: 54. 80%) w HIGM4 i 65,0% (zakres: 62. 68%) w grupie kontrolnej. Średnia częstość mutacji przejściowych przy dG lub dC (dG> dA, dC> dT) u pacjentów wynosiła 65,1% (zakres: 59. 76%), podobnie jak wartości kontrolne (63,1%, zakres: 58. 72%). Średnia częstotliwość mutacji przejściowych w dA lub dT (dA> dG, dT> dC) u pacjentów wynosiła 48,8% (zakres: 40. 75%) była również podobna do wartości kontrolnych (45,7%, zakres: 33. 57%) ( Figura 5b). Zatem HIGM4 charakteryzuje się normalną generacją SHM, które wykazują normalne wzory. Figura 5 Generowanie SHM w regionie VH IgM w HIGM4. (a) Częstość SHM w regionie VH IgM jest normalna u pacjentów z HIGM4. SHM w regionie VH3-23 IgM analizowano przy użyciu cDNA z komórek CD19 + CD27 + B z kontroli (n = 7), pacjentów HIGM2 (n = 9) i pacjentów HIGM4 (n = 6, P2, P5 P9) . Poziome kreski wskazują wartości średnie. (b) Wzorzec SHM w regionie VH IgM jest normalny u pacjentów z HIGM4. Pokazano średnią zawartość procentową zmian nukleotydów i celów SHM w regionie IgM VH3-23 u kontrolnych (n = 7) i pacjentów HIGM4 (n = 6, P2, P5 P9). Sekwencja genu uracylo-DNA-glikozylazy. Ponieważ myszy z niedoborem genu uracyl-DNA-glikozylazy (UNG) wykazują defekt CSR z ilościowo normalnymi SHM in vivo (19), zsekwencjonowaliśmy gen UNG od pacjentów HIGM4. Sekwencja genu UNG była normalna dla wszystkich 15 pacjentów (dane nie przedstawione). Omówienie W niniejszym dokumencie opisano nową jednostkę HIGM, HIGM4, o fenotypie klinicznym podobnym do tego, który ma niedobór AID (HIGM2), ale bez żadnych mutacji w genie AID. Podobnie jak pacjenci z HIGM2, pacjenci z HIGM4 cierpią na nawracające infekcje bakteryjne od dzieciństwa i nie cierpią na infekcje oportunistyczne, co wskazuje, że odporność na limfocyty T pozostaje nienaruszona. Hiperplazja narządu limfatycznego wydaje się mniej ostra w HIGM4 niż w HIGM2, chociaż dotyka połowę pacjentów. Podobnie jak w HIGM2, cechy autoimmunologiczne, szczególnie cytopenia, występują u jednej czwartej pacjentów. HIGM jest nieco mniej wyraźny w HIGM4 niż w HIGM2, ponieważ poziomy IgG w surowicy są mniej wyraźnie zmniejszone. Komórki B ulegały proliferacji normalnie po aktywacji sCD40L + rIL-4. Jednak CSR in vitro w kierunku IgE i IgG był głęboko uszkodzony, jak w HIGM2. Podobnie jak w HIGM2, defekt musi wystąpić po indukcji GLT, ponieważ GLT były normalnie indukowane po aktywacji sCD40L + rIL-4. Jednak defekt musi wystąpić przed procesem rekombinacji, ponieważ nie znaleziono pętli wycięcia (CT). Tak więc, chociaż sekwencja genu AID była normalna, uważaliśmy, że wadliwe wyrażenie AID może odpowiadać HIGM4. Hipotezę tę wykluczyło ustalenie prawidłowych ilości transkryptów RNA AID w aktywowanych komórkach B od pacjentów HIGM4. Normalne (lub podwyższone) poziomy IgM wykluczają rozpoznanie wspólnego zmiennego niedoboru odporności (CVID), który charakteryzuje się zmniejszeniem stężenia wszystkich izotypów Ig, w tym IgM (20). Ponadto odnotowano, że CSR in vitro jest prawidłowy, gdy analizowano limfocyty B od pacjentów z CVID (21). Jednakże, ponieważ CVID jest heterogenicznym i słabo zdefiniowanym zespołem, nie możemy wykluczyć, że istnieje pewne pokrywanie się CVID i HIGM4. Ponieważ większość zidentyfikowanych przypadków HIGM4 jest sporadyczna, nie możemy być całkowicie pewni, jak i czy ten zespół jest dziedziczny
[patrz też: nadciśnienie tętnicze profilaktyka, jakie produkty zawierają węglowodany, zdrowe jedzenie przepisy ]
[przypisy: poliklinika gdańsk, chemioterapia adjuwantowa, laboratorium elbląg ul nowowiejska ]