Znaczenie ekspresji antygenu mniejszej zgodności tkankowej przez tkanki niehematopoetyczne w modelu choroby przeszczepu przeciwko gospodarzowi z udziałem komórek T CD4 + T cd

Dane dotyczące masy wyrażono jako średni procent początkowej masy ciała podczas kolejnych okresów 1-tygodniowych po transplantacji. Istotność dla porównania wag między grupami została określona na podstawie testu ucznia w określonych punktach czasowych. Histologia. Sekwencyjne biopsje uszu pobierano od myszy w określonych punktach czasowych lub po uśmierceniu zwierzęcia po zakończeniu eksperymentu i przygotowywano do rutynowej analizy histologicznej, jak opisano wcześniej (13). W celu ilościowego oznaczenia dyskeratotycznych komórek naskórka, próbki skóry oceniano pod kątem cech apoptotycznych keratynocytów (skurczonej cytoplazmy hipereozynofilowej, jądra pyknotyczne) za pomocą mikroskopii świetlnej (13). Dane są oparte na zliczeniach z co najmniej 10 milimetrów liniowych (Lmm) naskórka na próbkę i są zgłaszane jako wskaźnik dyskeratotyczny (średnia liczba SEM apoptotycznych keratynocytów na Lmm, odnośnik 14). Pomiary grubości skóry uzyskano za pomocą mikrometru siatki ocznej, od połączenia skórnego / naskórkowego do najgłębszego zasięgu skóry właściwej siatkowatej i są one oparte na dziesięciu losowych pomiarach na próbkę, arbitralnie oddzielonych Lmm. Aby uniknąć nieswoistej zmienności grubości skóry, wszystkie pomiary zostały pobrane z biopsji pobranych z tego samego regionu ucha. Wszystkie obserwacje wykonano metodą podwójnie ślepej próby przez doświadczonego dermatopatologa. Wyniki W modelu G6HD BALB.B ze śmiertelną napromienianiem, myszy dawcy i biorcy różnią się od siebie co najmniej 29 różnymi loci miHA (15). W celu określenia istotności ekspresji miHA przez tkanki krwiotwórcze lub niehematopoetyczne gospodarza do opracowania letalnej GVHD w obrębie tej bariery dla wielu mi-ha, chimerycznych biorców BM [BALB.B. B6] ustalono tak, że jedynym źródłem alloantygenu był przedział krwiotwórczy. W tym celu myszy B6 poddano promieniowaniu letniskowemu (13 Gy, podzielona dawka) i wstrzyknięto × 107 komórek BALB.B ATBM. Chimeryzm BALB.B określono 3. 4 miesiące później przez cytometryczne barwienie splenocytów dla glikoproteiny na powierzchni komórki Ly9.1, marker limfatyczny wykryty na więcej niż 98% komórek śledziony i węzłów chłonnych (16), z różnicową ekspresją między BALB .B (Ly9.1 +) i B6 (Ly9.1 .) szczepy myszy. W analizowanych chimerach [BALB.B. B6] co najmniej 87% przedziału limfocytów T i co najmniej 98% przedziału limfocytów B pochodziło z BALB.B, jak zmierzono przez barwienie anty-CD3 i anty-B220. , odpowiednio. Co najważniejsze, ponad 90% dużych komórek CD11c + pochodziło z BALB.B, prawdopodobnie reprezentujących DC pochodzenia limfatycznego (17. 19). Po potwierdzeniu przeszczepienia krwiotwórczego BALB.B, chimery BM [BALB.B. B6] powtórnie otrzymywały ponownie (10 Gy, dawka podzielona) i wstrzykiwano je komórkami ATBM 2 x 106 B6 plus komórki T CD4 + 1,5 x 107 B6. Identycznie przeszczepione chimery BM [BALB.B. BALB.B] i [B6. B6] zastosowano odpowiednio jako kontrole dodatnie i ujemne GVHD. Wszyscy chimeryczni biorcy [BALB.B. BALB.B] ulegli ostrej GVHD, z MST 26,2 dni, podczas gdy biorcy [B6B6] CD4 nie doświadczyli letalności GVHD (MST> 75 dni, Figura 1a, Tabela 1). Co istotne, wstrzyknięcie komórek T CD4 + 1,5 x 107 B6 do chimerycznych biorców [BALB.B. B6] nie spowodowało letalności GVHD (MST> 75 dni). W tej grupie stwierdzono jednak przejściową kacheksję (kontrola P-0,024 vs. syngeniczna kontrola [B6-B6], Figura 1b), w 2 i 3 tygodniu po HCT, wskazująca początkową odpowiedź komórek T CD4 + przeciwko miHA wyrażoną przez BALB. .B przedział krwiotwórczy. Powtórzone doświadczenie z zastosowaniem identycznych dawek napromieniania, ale z iniekcją komórek T CD4 + 2 × 107 B6, również nie spowodowało letalności w chimerach [BALB.B. B6] (MST> 90 dni; Tabela 1). Tak jak poprzednio, wszyscy biorcy [BALB.B. BALB.B] ulegli GVHD (MST 13.3 dni), podczas gdy śmiertelność nie została odnotowana w grupie [B6. B6] (MST> 90 dni). Figura Ekspresja zgodności antygenu zgodności tkankowej tylko przez same tkanki krwiotwórcze gospodarza nie wywołuje letalnej GVHD. Ustalone chimery BM [BALB.B. BALB.B], [BALB.B. B6] i [B6. B6] ponownie otrzymywano ponownie (10 Gy, dawka podzielona) i wstrzykiwano je komórkami ATBM 2 x 106 B6 w połączeniu z 1,5 x 107 komórek B6 CD4 +. (a) Przeżycie przeszczepionych biorców. (b) Masy ciała dla każdej grupy znormalizowanej jako średnia procentowa początkowa masa ciała. SEM w kolejnych okresach 1-tygodniowych. n = 5 dla B6 A [BALB.B. BALB.B] i [BALB.B. B6], a n = 6 dla B6 A [B6 A B6]. Tabela Podsumowanie danych z przeszczepów z miHA ograniczonym do przedziału krwiotwórczego Objawy skórne ostrej GVHD są dokładnym wskaźnikiem ciężkości choroby klinicznej, a stopień uszkodzenia apoptotycznego komórek naskórka skóry stanowi wiarygodny parametr choroby (14).
[hasła pokrewne: chemioterapia adjuwantowa, chirurgiczne leczenie otyłości, przepis na dietetyczne ciasto ]
[patrz też: wojewódzka przychodnia stomatologiczna gdańsk, ortodonta gdańsk nfz, akademia medyczna gdańsk stomatologia ]